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求关于微生物冻干菌株复苏的一些注意事项尤其
时间:2020-02-11 08:50

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  广东环凯微生物科技有限公司是广东省微生物研究所属下的国家级高新技术企业,国内食品及药品安全监测和控制高技术产品的重要研发和生产基地。产品有生物试剂、培养基、菌种、理化快检产品、化学试剂等。

  用无菌吸管将菌种复苏液体培养基约0.3ml左右注入被启开的菌种瓶中并吹打,使瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液;

  将上述菌悬液吸出,分别接种到非选择性固体斜面或平板如:血平板和菌种复苏培养基中,一般放置在37℃培养箱培养18~24h。对需要特殊培养条件的细菌,如需5%~10%二氧化碳或厌氧条件等,应分别于二氧化碳培养箱或厌氧培养箱中培养;

  次日取出培养物,仔细观察菌苔(落)形态、有无杂菌生长、并进行涂片染色镜检,若无异常,转种1~2代后可使用;

  如发现培养物生长不良或不纯,可用选择性培养基进行平板分离单个菌落后再传代。不同的细菌对冷冻干燥的抵抗能力不同,弧菌对冷冻干燥的抵抗能力相对较弱,在冷冻干燥过程中菌体细胞容易受伤。因此复苏时应根据其生长特性,选用碱性蛋白胨水(霍乱弧菌)或3%氯化钠碱性蛋白胨水(副溶血性弧菌、创伤弧菌)为复苏培养基,待菌体细胞修复后再接种于适合弧菌生长的非选择性培养基上培养。